高二下册生物菊花的组织培养实验操作知识点
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高二下册生物菊花的组织培养实验操作知识点
(一)制备MS固体培养基
1、配置各种母液
2、配置培养基①定容② 调PH
③培养基的分装3、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌
1、选材:菊花茎段,取生长旺盛的嫩枝
(二)外植体消毒
2、消毒:
流水冲洗—酒精—无菌水冲洗—**—无菌水冲洗至少三次之上
(三)接种
用70%的酒精喷雾使空气消毒, 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟
1、接种室消毒
2、无菌操作要求
操作要在酒精灯火焰旁完成,每次使用器械后,都需要用火焰灼烧灭菌,接种后立即盖好瓶盖。
3、材料的切取和接种
4、接种注意事项
①每接种一块外植体前,镊子需放入体积分数为75%的酒精溶液中消毒一次,然后在酒精灯火焰上烧一遍,冷却后再接种
②外植体在培养基中要分布均匀,放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定,一般胡萝卜3-4块,菊的茎或叶6-8块,也不要太少,以充分利用培养基中的营养成分和光照条件
③插入时应注意方向,不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分
(四)培养
无菌箱中培养,定期消毒,保持适宜的温度,光照
(五)移栽
1、打开封口膜
2、清洗转移至消过毒的蛭石或珍珠岩中幼苗长壮后,移栽到土壤中